J Clin Invest：揭示USP9X去泛素化ALDH1A3并维持GCSs的间充质属性

胶质原发持续性（GBM）是最常见和威胁持续性的人脑恶持续性，其特征在于广泛的内异质持续性。尽管最近在多手段也外科手术之外取得了方面，但GBM病患者的结果几乎令人沮丧。GBM拥有一个肝细胞亚群，称为GBM肝细胞培养（GSCs），具有自我更换活持续性和多向分既有创造持续性以及起始能力也。因此，迫切需要探究针对GSC的新外科手术方针。并且，醛脱氢酶（ALDH）原核生物包含19种酶，它们将内源和简而言之醛代谢成相应的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，展开人染色质的各种生理过程。更加多的论据说明了，ALDH1A3在癌症肝细胞培养（CSCs）里面实出出高活持续性，并冲击这些肝细胞内的各种病理学特征。在GBM里面，已见到ALDH1A3作为保持稳定时有充质（MES）GSC的自我更换和致瘤持续性的更为重要分子。然而，MES GSCs里面ALDH1A3失调的机制几乎是神秘的。2019年4月8日，南京医科大学第一附属医院王慧博设计团队等人在The Journal of Clinical Investigation上发表并作“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的文章，见到USP9X是一种只不过的DUB，可闭环ALDH1A3多脯氨酸既有和稳定既有。并且，USP9X是预测ALDH1A3hi MES GSCs富集的更为重要分子，是MES GSCs自我更换和致瘤持续性所必需的。同时还检验了USP9X诱发对病患者来源的MES GSC异种重制模型的潜在治果。为了已确定ALDH1A3蛋白是否被脯氨酸 - 线粒体系统（UPS）译成后控制，研究工作管理人员首先使用放线菌酮（CHX）阻断肝细胞内从头合成并HEK293T肝细胞和似乎星形胶质肝细胞（NHAs）里面的ALDH1A3肝细胞内程度。实际上，ALDH1A3在CHX处理的8小时内逐渐分解并完全检测至少。此外，用线粒体诱发剂MG-132处理肝细胞导致ALDH1A3蛋白程度实着增高。这些图表说明了ALDH1A3通过UPS分解。接下来，研究工作管理人员寻求解剖专责ALDH1A3稳定既有的潜在DUB，并使用靶向HEK293T肝细胞里面的98DUB的siGENOMERTF月刊少年展开RNAi筛选。该研究工作初始筛选解剖了与ALDH1A3暗示特别的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293肝细胞里面的ALDH1A3共暗示时，见到只有USP9X能够与内源持续性ALDH1A3同样强子，从而暗示USP9X是控制ALDH1A3稳定持续性的实着候选物。为了试验这一点，将Flag标记的WT USP9X或催既有失活的突变体C1566A USP9X（在催既有RNA的一个更为重要半胱氨酸里面携带点突变）转染到HEK293T肝细胞里面。 WT USP9X而非C1566A突变体的暗示以剂量依赖持续性手段增高ALDH1A3蛋白程度，说明了USP9X以依赖于其DUB活持续性的手段闭环ALDH1A3。胶质原发持续性（GBM）肝细胞培养（GSC）的时有充质（MES）亚型代表者癌肝细胞亚群，其因其高度侵袭持续性和对常规化学疗法的施用而闻名。最近已提出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为保持稳定GSC的MES特征的更为重要这两项。然而，全力支持精神状态ALDH1A3暗示的机制几乎难以捉摸。在该研究工作里面，研究工作管理人员见到脯氨酸特异持续性蛋白酶9X（USP9X）是MES GSC里面ALDH1A3的只不过去脯氨酸既有酶。 USP9X与ALDH1A3强子，长丝并稳定既有。此外，研究工作结果实示FACS分选的USP9Xhi肝细胞富集具有高ALDH1A3活持续性和有效致瘤能力也的MES GSC。USP9X的消耗实着降至ALDH1A3，导致MES GSC的自我更换和致瘤能力也的完全恢复，这可以通过ALDH1A3的乳癌暗示取得很大程度的挽救。此外，研究工作管理人员还证明USP9X诱发剂WP1130诱发ALDH1A3分解并且在MES GSC衍生的而会异种重制模型里面实示出实着的外科手术功效。另外，USP9X与原发持续性人GBM样品里面的ALDH1A3暗示强烈特别，并且对于具有MES亚组的病患者具有预后价值。总的来说，研究工作结果了解到了USP9X作为ALDH1A3蛋白稳定既有的更为重要去脯氨酸既有酶和GSC定向外科手术的潜在抗病毒。原始出处：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019