亲和素-生物素系统，如何减少干扰，更佳地应用于免疫检测

1. 什么是交好和伦-糖类子系统

（链霉）交好和伦-糖类是免疫探测里常用的信号放大子系统。交好和伦是蛋清里常见的糖类巨噬细胞内，由四个相同的亚基均是由。每一个亚基都包含一个糖类紧密结合位点，因此一个理论上长星期的交好和伦必需紧密结合4个糖类。交好和伦与糖类不具非常强烈的依赖性，其解离方程大共约是1.3*10-15M，是已确定海洋生物体里最强的非阳离子强子之一。交好和伦的巨噬细胞内质结构上非常稳定，即使在含量千分之8M的尿伦溶液里，也必需维持结构上的完整性，保持对糖类的依赖性。并且在紧密结合糖类后，交好和伦-糖类结构上的稳定度大幅度强既有，研究表明，即使在含量为8M的盐酸萘里，交好和伦-糖类复合物依然必需稳定普遍存在。另外，交好和伦-糖类的紧密结合与防原-防原的紧密结合十分相似，有极高的依赖性，必需在复杂的溶液环境里相互间紧密结合，因此，交好和伦-糖类子系统国际上应用在免疫探测里。其里应用非常国际上的方式为是将交好和伦都从在磁珠较厚，糖类标示出防原。

△糖类磁珠，糖类既有防原免疫探测上所示

2. 交好和伦，链霉交好和伦，以及里性交好和伦

交好和伦巨噬细胞内是钠盐糖巨噬细胞内，相对分子质量共约为67kDa，巨噬细胞内质等电点共约为10。由于巨噬细胞内质等电点较高，在pH里性先决条件下，交好和伦带上正电。并且交好和伦普遍存在寡糖成分（主要由组氨酸和N-乙酰苯基均是由的异质结构上），容易与巨噬细胞较厚、核酸、凝集伦等有机物消除非依赖性紧密结合，遭受本底过高的情况。链霉交好和伦是由链菌类里表达纯既有出的巨噬细胞内，与交好和伦十分相似，链霉交好和伦也由四聚体均是由，每个单体都可以以极高的依赖性紧密结合一个糖类。完全相同的是，链霉交好和伦没有糖链，相对分子质量比交好和伦略高，大共约为53kDa，巨噬细胞内质等电点在6.8~7.5之间，非依赖性填充也比交好和伦要小很多。

另外一种国际上用作的交好和伦是里性交好和伦（NeutrAvidin）。里性交好和伦实际是去除糖链后的交好和伦，相对分子质量共约为60kDa，巨噬细胞内质等电点为6.3。由于去除了糖链，里性交好和伦的非结构上得到了巨大的降高，同时又保留了交好和伦对糖类极高的依赖性。

△几种交好和伦的性质对比

3. 糖类及其有机既有合物结构上

糖类又被被称作钙H，或者钙B7，是一种糖类钙，其功能是在肝细胞参与脂肪、糖、巨噬细胞内代谢等最主要有机物的生既有加成。糖类国际上普遍存在与动物肝、肾、酵母、牛乳里。

△糖类分子结构上所示

糖类相对分子质量共约为244，必需以阳离子键的基本，标示出在防原巨噬细胞内的较厚，而不阻碍巨噬细胞内质的防氧化。因此国际上用于巨噬细胞内标示出，进而通过交好和伦-糖类子系统对标示出巨噬细胞内顺利完成分离、富集、探测。

如今通过完全相同的改装方式为，糖类有各种各样的有机既有合物，糖类标示出巨噬细胞内的技术也愈发成熟。糖类有机既有合物结构上基本上由糖类双环结构上，酰胺侧链，较宽支架，以及加成羧基均是由。其里较宽支架的粗大幼水性，宽度对于巨噬细胞内的标示出效率，标示出后糖类与交好和伦后续加成性有最主要阻碍。如链霉交好和伦与糖类紧密结合位点是一个口袋型结构上，深达大共约有0.9纳米。因此，糖类的较宽支架宽度，阻碍了到标示出在巨噬细胞内较厚的糖类是否必需进到交好和伦加成口袋里。在某些应用里，粗大较宽支架的糖类不具更高的分析敏感度。

△糖类有机既有合物结构上上所示

△常用糖类支架粗大及相对分子质量

4. 糖类阻碍

海洋生物阻碍是交好和伦-糖类子系统探测里普遍普遍存在的情况。采行交好和伦-糖类子系统顺利完成免疫探测时，如果待测抽样里存如果普遍存在高含量的诱导糖类，将与糖类既有防原竞争紧密结合交好和伦的紧密结合位点，进而阻碍探测结果。

作为糖类B部族钙，糖类在肝细胞主要经过肾脏代谢。长星期人体尿液里糖类含量范围大共约在0.28~0.55ng/mL，近高于各类免疫探测羰基箱里声称的消除阻碍的糖类含量。但是日常可用糖类的年轻人不在少数，根据一项统计数据，宾夕法尼亚州大共约有15%的年轻人日常可用糖类。而一篇发表在ClinicalChemistry上的研究文献结果显示，长星期人在抗生素100mg糖类后1.5每隔，尿液里糖类含量降到峰值，千分之为762.52ng/mL，24每隔后，含量下降至千分之71.59ng/mL，高于许多探测羰基箱声称的糖类阻碍含量以内。而且依据完全相同的糖类mg，以及完全相同探测羰基的性能，抗生素糖类后对探测的阻碍可能接下来至48每隔。

△各大子系统所致糖类阻碍统计分析。（引，为宾夕法尼亚州FDA引册项目）

由于基本上不采行糖类交好和伦子系统，雅培的免疫探测羰基长期以无糖类阻碍作为卖点之一。实际上在2011年引册的钙D探测羰基里，雅培采行了糖类标示出的钙D作为竞争有机既有合物，与鼠防糖类防原标示出的吖啶醇作为标示出物顺利完成探测，因此也时会在一定某种程度上所致到糖类阻碍。

5. 防糖类阻碍的法则

理论上所有采行交好和伦-糖类子系统的探测羰基箱都时会所致到糖类阻碍。以外有几种法则可以降高糖类阻碍，或者更高羰基对糖类阻碍的耐所致性。

最简单这样一来的法则是更高交好和伦的加入量，如加大交好和伦磁珠的含量，以更高加成框架对糖类的载量，但是这种做法通常时会增加羰基的生产成本，而且改善的某种程度有限。另外一种合理的法则是提前将交好和伦糖类和糖类既有糖类提前预混，让交好和伦先与糖类既有防原加成，进而减缓抽样里诱导糖类对加成的阻碍。诊断羰基箱一般是采行链霉交好和伦磁珠-糖类加成框架，因此在化解糖类阻碍的情况上，各大公司长期在创新的发展，努力必需无论如何彻底化解这一情况。例如，据悉出炉的一项知识产权结果显示，某一公司诊断联合开发出一种防糖类阻碍的防原，必需依赖性紧密结合诱导糖类，而对标示出在防原较厚的糖类不紧密结合，因此可以作为防阻碍糖类添加至加成框架里，通过紧密结合抽样里诱导的糖类而减缓阻碍。另外一种法则是采行防糖类防原替代交好和伦类巨噬细胞内。如宾夕法尼亚州公司总部初创公司就联合开发出了特定的防糖类防原，其对糖类的依赖性与交好和伦类巨噬细胞内非常，但是与诱导糖类的依赖性则要高100万倍。

-论述-

虽然糖类阻碍长期普遍存在，也已经得到完全化解。但是非常多厂家依然在既有学发光免疫探测里用作（链霉）交好和伦-糖类子系统，一个状况是早期联合开发过程里采行了此类方式为也，如果摈弃或扭曲这种方式为也，无异于重新联合开发羰基，调整仪器子系统，并且需要重新顺利完成引册审核，需要花费大量的急需，以及消耗非常粗大的星期。另一个状况是采行这种方式为也必需简既有羰基联合开发高效率，并且在一定某种程度上降高羰基生产成本。不管出于何种状况，（链霉）交好和伦-糖类子系统依然国际上用于免疫探测里，但是糖类阻碍是一个不容忽视的情况。